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L’esame del Fluido Cerebro-Spinale (CSF) Medicina di Laboratorio CLM ASAPIENZA UNIVERSITA’ DI ROMA

L’esame del Fluido Cerebro-Spinale (CSF) Medicina di Laboratorio CLM A

SAPIENZA UNIVERSITA’ DI ROMA

Fluido Cerebro-Spinale o Liquido cefalo-rachidiano o Liquor

Liquido limpido e incolore, che circola lentamente negli spazi cerebrali e del midollo spinale: Volume tra 90 – 150 ml Peso specifico 1.008 Pressione clinostatismo 150 mmH2O, ortostatismo 400 mmH2O

SINTESI e FUNZIONI Prodotto nei plessi corioidei e nei ventricoli Ricambio continuo attraverso i villi aracnoidei Assorbe i traumi cranici Regola la pressione intracranica Fornisce nutrimento al sistema nervoso Rimuove i cataboliti

Barriera emato-encefalica (rivestimento epiteliale dei plessi corioidei)

Controllo e filtrazione con diffusione selettiva o passiva ioni (Cl-, K+ , Na+, Ca++, Mg++) = trasporto specifico glucosio, urea, creatinina = diffusione libera Proteine totali del plasma Sostanze liposolubili (es. a. etilico, anestetici) .. (gradiente CSF/plasma)

Indicazioni cliniche

Meningiti e meningoencefaliti (urgenza) Sclerosi multipla, encefaliti demielinizzanti Poliradicolonevriti disimmuni Carcinomatosi meningea Neuropatologia in M. infiammatorie/autoimmuni Emorragia sub-aracnoidea (non definibile con TC) Processi extra-cerebrali con oto/rinoliquorrea M. di Creutzfeldt-Jacob M. di Alzheimer

PRELIEVO DI CSF

Prelievo mediante puntura lombare con raccolta da 4 a 5 ml da aliquotare *: 1° tubo per microbiologia 2° “ per conteggio cellule ematiche, chimica e sierologia 3° “ per analisi specifiche (VDRL, elettroforesi, Ag e Ab) Prelevare contestualmente campione di sangue *In caso di puntura traumatica o di sospetta emorragia subaracnoidea raccolta in 3 provette consecutive.

ESAME MACROSCOPICO

ASPETTO: limpido opalescente, torbido, purulento, (torbido da 1+ a 4+) pleocitosi, microrganismi, emazie, proteine, mezzo di contrasto COLORE: Incolore ematico emorragia cerebrale, trauma spinale o da prelievo xantocromico da rosa chiaro a giallo scuro (ossi- e meta-emoglobina, proteine, bilirubina > 6 mg/dl, melanina, carotene) in alcune m. itterigene (m.emolitica del neonato) bilirubina che diffonde attraverso la barriera ematoencefalica) giallo (bilirubina > 10 mg/dl da emorragia)

Aspetto patologico

Torbido (+ da 1 a 4): numero abnorme di polinucleati meningite tubercolare Opalescente: Microrganismi (meningiti da piogeni) Linfociti (meningiti da virus , forme subacute e croniche) irritazione meningeale per processi estranei allo spazio subaracnoideo (otiti purulente, ascessi cerebrali, flogosi, tumori cerebrali, tossicosi generali).

ESAME MACROSCOPICO del LIQUOR

Dopo centrifugazione: SOVRANATANTE Limpido Opalescente proteine, mezzo di contrasto Ematico lisi delle emazie SEDIMENTO Assente Presente: cellule, microrganismi

COMPOSIZIONE CHIMICA VALORI NORMALI

GLUCOSIO* 40-70 mg/dL =/< AC. LATTICO 10-24 mg/dL GLUTAMINA 5-20 mg/dL UREA 6-16 mg/dL =/< CREATININA 0.5-1.2 mg/dL = LDH 0-40 U/L < BILIRUBINA* assente *Bil. indiretta (non coniug) attraversa la BEE * gluL/gluS = 0.79 o >45%

ELETTROLITI - pH VALORI NORMALI

pH 7.28-7.32 = SODIO 135-160 mEq/L = CLORO 115-130 mEq/L > POTASSIO 2.6-3.0 mEq/L < CALCIO 2.0-2.8 mEq/L < MAGNESIO 2.4-3.0 mEq/L < PCO2 44-50 mm Hg PO2 40-44 mm Hg

Proteine del liquor Il passaggio delle proteine dal cervello al liquor e dal sangue al liquor, segue le leggi della diffusione ed è funzione del peso molecolare

Proteine del liquor Nel liquor, la concentrazione delle proteine che derivano dal sangue dipende: 􀀹 dalla concentrazione nel plasma 􀀹 dall’età 􀀹 dal sito di prelievo 􀀹 dal volume prelevato ed è influenzata particolarmente dal flusso del liquor

Proteine liquorali

PROTEINE TOT. 15-45 mg/dL < ALBUMINA 10-35 mg/dL < Concentrazione inferiore all’80% delle proteine plasmatiche: Proteine siero correlate (mg/dL): pre Alb, Alb, Transferrina, α-1, α-2, β-2, immunoglobuline Proteine metabolismo del SNC (μg/L): NSE, t-TAU, P-TAU, proteina 14.3.3, Glial Fibrillary Acidic Protein, S-100, transferrina (asialo e monosialo), amiloide β 1-42, Mielin Basic Protein, βTrace-protein

Variazioni patologiche delle proteine liquorali • Danno di barriera – alterazione degli scambi liquor/sangue che causa un passaggio delle proteine del sangue verso il liquor: diminuzione relativa delle proteine presenti specificamente nel liquor (transtiretina, asialotransferrina) per diluizione con le proteine del plasma • Sintesi intratecale – aumento relativo delle proteine specifiche del liquor – sintesi locale d’immunoglobuline • Alterazioni riflesse

• Rilevare le variazioni qualitative della composizione in proteine • Permettere l’analisi di un piccolo volume di campione Diagnosi differenziale tra danno di barriera e sintesi intratecale CARATTERISTICHE IDEALI

Danno di barriera

Alb siero Alb liquor Alb liquor x 103 Alb siero La determinazione dell’ALBUMINA nel siero e nel liquor è l’indice più accurato del grado di permeabilità: > 130 < 7 Può essere espresso in percentuale: Normale < 0.7% Lieve < 2 % Moderato < 5 % Grave > 5 %

ANALISI QUANTITATIVA IgG-CSF Ig-serum Alb-CSF Alb-serum Q IgG = Q Alb = IgG Index = Q IgG Q Alb NORMALE < 7

Gamma globuline liquorali

Immunoglobuline G sintetizzate da cloni cellulari B del SNC in corso di infiammazione, Indice più sensibile di sintesi intratecale di immunoglobuline G: Studio delle bande oligoclonali con isoelettrofocalizzazione e immunorilevazone: Si usano ANFOLITI trasportatori di cariche elettriche Hanno potere risolutivo superiore alla classica elettroforesi in tampone alcalino Specificità 100% Sensibilità 98%

Consensus Conference of the Committee of the European Concerted Action for Multiple Sclerosis Raccomandazioni per la valutazione della sintesi intratecale di IgG: • Siero e liquor devono essere prelevati e studiati in parallelo sullo stesso gel alla stessa concentrazione di IgG • Il liquor non deve essere concentrato, ma si diluisce il siero, • Le IgG devono essere caratterizzate da una fase immunologica • Le proteine devono essere separate per iso-elettro-focalizzazione

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CSF3 (PPTshare)
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L’esame del Fluido Cerebro-Spinale (CSF) Medicina di Laboratorio CLM ASAPIENZA UNIVERSITA’ DI ROMA
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microbiologia | liquor | proteine | sintesi | intratecale | siero | igg | aumento | diagnosi
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4/6/2009 4:42:34 PM
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